Solución de Iodo (Lugol) para tinción GRAM, QCA

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• PRINCIPIO La tinción de Gram fue creada en 1884 por Christian Gram y es un elemento fundamental en la identifi cación microbiológica. Aunque Gram observó lo que ahora se denomina la “reacción de Gram”, no reconoció el valor taxonómico de su técnica. La tinción de Gram permite diferenciar las bacterias en dos grupos según el color de la célula después de la tinción. Es un sistema de dos tinciones simples sucesivas, separadas por una fase de decoloración. Permite diferenciar las bacterias que retienen el primer color,que aparecen azules (Gram positivas) de las que no lo retienen y se tiñen de rosa (Gram negativas). La diferencia se debe a la pared celular. La clave es el peptidoglicano, ya que es el material que confi ere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las gram negativas. Esta pared celular debe estar intacta para una correcta tinción. Durante la tinción, la pared celular de las células grampositivas se deshidrata por el alcohol del decolorante y pierde permeabilidad, por lo que retiene el complejo formado por el colorante primario (violeta cristal) y el iodo (mordiente). Por el contrario, las células gramnegativas que tienen una pared con mayor contenido lipídico se vuelven más permeables en la decoloración con alcohol y pierden el colorante primario, quedando teñidas posteriormente con el colorante de contraste (safranina o fucsina).